金属食品罐内涂层中双酚S迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法

ICS 87.020 G 50 福 DB35 建 省 地 方 标 准 DB35/T 1851—2019 金属食品罐内涂层中双酚 S 迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 Determination of bisphenol S migration in food metal can linings— High performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry 2019 - 09 - 11 发布 福建省市场监督管理局 2019 - 12 - 11 实施 发 布 福 建 省 地 方 标 准 金属食品罐内涂层中双酚 S 迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 DB35/T 1851—2019 * 2019 年 9 月第一版 2019 年 9 月第一次印刷 DB35/T 1851—2019 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 规范性引用文件 .................................................................... 1 3 术语和定义 ........................................................................ 1 4 原理 .............................................................................. 1 5 试剂与材料 ........................................................................ 2 6 仪器与设备 ........................................................................ 3 7 食品模拟试液的制备 ................................................................ 3 8 检测 .............................................................................. 3 9 重现性 ............................................................................ 5 10 检出限 ........................................................................... 5 附录 A（资料性附录） 双酚 S 标准物质的液相色谱-质谱/质谱总离子流色谱图 ................ 6 I DB35/T 1851—2019 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由厦门市市场监督管理局提出。 本标准由福建省物流包装产品标准化技术委员会（SAFJ/TC 23）归口。 本标准起草单位：厦门市产品质量监督检验院、福建省产品质量检验研究院。 本标准主要起草人：白泽清、高静、白荣汉、方荣谦、王征。 II DB35/T 1851—2019 金属食品罐内涂层中双酚 S 迁移量的测定 高效液相色谱-串联质谱法 1 范围 本标准规定了金属食品罐内涂层中双酚S（BPS）迁移量检测的术语和定义、原理、试剂与材料、仪 器与设备、食品模拟试液的制备、检测、重现性和检出限。 本标准适用于金属食品罐内涂层中双酚S迁移量的高效液相色谱-串联质谱法检测。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB 31604.1 食品安全国家标准 食品接触材料及制品迁移试验通则 3 术语和定义 GB 31604.1界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用，以下重复列出了GB 31604.1 中的一些术语和定义。 3.1 迁移试验 migration test 在规定条件下，为测定食品接触材料及制品的组分迁移到与之接触的食品或食品模拟物中的量而进 行的试验。 [GB/T 31604.1—2015，定义2.1] 3.2 食品模拟物 food simulant 能够接近真实地反映食品接触材料及制品中组分向与之接触的食品中的迁移，具有某类食品的典型 共性，用于模拟食品进行迁移试验的测试介质。 [GB/T 31604.1—2015，定义2.2] 4 原理 食品模拟物中的双酚S通过高效液相色谱-串联质谱法进行分离检测。水溶性食品模拟物直接进样， 油性食品模拟物通过甲醇-水溶液萃取后进样。采用外标法定量。 1 DB35/T 1851—2019 5 试剂与材料 5.1 试剂 5.1.1 5.1.2 5.1.3 5.1.4 5.1.5 5.1.6 5.2 除非另有说明，所用试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。 冰乙酸（CH3COOH）。 无水乙醇（C2H5OH）。 植物油（玉米油）。 95%乙醇（C2H5OH）。 甲醇（CH3OH）。 试剂配制 5.2.1 5.2.2 5.2.3 5.2.4 5.2.5 5.3 4%乙酸溶液（体积分数）：量取 20.0 mL 冰乙酸（5.1.2），加 480.0 mL 水，混匀。 10%乙醇溶液（体积分数）：量取 50.0 mL 无水乙醇（5.1.3，加 450.0 mL 水，混匀。 20%乙醇溶液（体积分数）：量取 100.0 mL 无水乙醇（5.1.3），加 400.0 mL 水，混匀。 50%乙醇溶液（体积分数）：量取 250.0 mL 无水乙醇（5.1.3），加 250.0 mL 水，混匀。 甲醇-水混合液（体积比 1:1）：量取 100.0 mL 甲醇（5.1.6）和 100.0 mL 水，混匀。 标准品 双酚S（C12H10O4S），纯度≥98.5%。 5.4 5.4.1 标准溶液配制 BPS 标准储备溶液（100 mg/L） 称取100 mg（精确至0.1 mg）BPS标准品（5.3）于1 000 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容，使BPS 浓度为100 mg/L，置于-20 ℃冰箱中保存，有效期12个月。 5.4.2 BPS 中间浓度标准溶液（100 μg/L） 准确吸取0.1 mL BPS标准储备溶液（5.4.1）于100 mL容量瓶中，用甲醇-水混合液（5.2.5）定容， 使BPS浓度为100 μg/L，置于4 ℃冰箱中保存，有效期3个月。 5.4.3 标准工作溶液配制 5.4.3.1 水溶性食品模拟物：准确移取 BPS 中间浓度标准溶液（5.4.2）0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、 2.0 mL、5.0 mL 于 10 mL 容量瓶中，用 4%乙酸溶液（体积分数）（5.2.1）定容，得到 BPS 浓度分别为 2 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L 的标准工作溶液。采用同样方式，分别用 10%乙醇 溶液（体积分数）（5.2.2）、20%乙醇溶液（体积分数）（5.2.3）、50%乙醇溶液（体积分数）（5.2.4） 配制同样浓度系列的 BPS 标准工作溶液。 5.4.3.2 油性食品模拟物：分别称取 1 g（精确至 0.000 1 g）植物油至 5 个具塞试管中，用微量玻璃 注射器分别移取 0.02 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL BPS 标准品溶液（5.4.2）加入植物油中， 得到 BPS 质量浓度为 2 μg/kg、5 μg/kg、10 μg/kg、20 μg/kg、50 μg/kg 的系列标准工作溶液。 往每个试管中再加入 3 mL 正己烷，混匀，加入 2 mL 甲醇-水混合液（5.2.5），涡旋振荡 3 min，静置 分层，用玻璃注射器吸取下层水溶液，经亲水 PTFE 针式过滤器（6.5）过滤，滤液供液相色谱-串联质 谱仪检测。 2 DB35/T 1851—2019 6 仪器与设备 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 7 液相色谱-串联质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。 涡旋振荡器。 恒温恒湿箱。 分析天平：感量 0.000 1 g。 0.22 μm 亲水 PTFE 针式过滤器。 微量玻璃注射器（50 μL 和 500 μL）。 食品模拟试液的制备 7.1 迁移试验 食品模拟物及迁移条件按照GB 31604.1的规定。 7.2 迁移样液的处理 7.2.1 水溶性食品模拟液 准确吸取1 mL迁移试验（7.1）中得到的食品模拟液，经亲水PTFE针式过滤器（6.5）过滤，滤液供 液相色谱-串联质谱仪检测。平行制样两份。 7.2.2 油性食品模拟物 准确称取迁移试验（7.1）中得到的油基食品模拟物1 g（精确至0.000 1 g）于具塞试管中，加入 3 mL正己烷，混匀，加入2 mL甲醇-水溶液（5.2.5），涡旋振荡3 min，静置分层，用玻璃注射器吸取 下层水溶液，经亲水PTFE针式过滤器（6.5）过滤，滤液供液相色谱-串联质谱仪检测。平行制样两份。 7.2.3 空白试液 本试验中的空白试液为未与金属食品罐接触过的食品模拟物。 8 8.1 检测 色谱/质谱条件 液相色谱的参考条件如下： a) 色谱柱：Waters Acquity UPLC® BEH C18，1.7 μm，100 mm×2.1 mm，或性能相当的色谱柱； b) 柱温：35 ℃； c) 流动相：A 为水，B 为甲醇，梯度洗脱程序为 0 min，65%A；2.0 min，10%A；4 min，0%A；5 min， 0%A；5.1 min，65%A；8 min，65%A； d) 流速：0.2 mL/min； e) 进样体积：2 µL。 1) 质谱的参考条件如下 ： a) 离子源：电喷雾（ESI）； 1) 本列项的信息是在 AB Sciex Triple Quad 5500 质谱仪上完成的，此处列出的试验仪器型号仅是为了提供参考， 并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。 3 DB35/T 1851—2019 b) c) d) e) f) g) h) i) j) 扫描方式：负离子扫描； 检测方式：多反应监测（MRM）； 离子源温度（TEM）：550 ℃； 电喷雾电压（IS）：-5 500 V； 气帘气压力（CUR）：40 psi； 雾化气压力（GS1）：55 psi； 辅助气压力（GS2）：60 psi； 驻留时间：100 ms； 待测物的母离子、子离子、去簇电压（DP）和碰撞能量（CE）见表 1。 表1 化合物 母离子（m/z） BPS a 8.2 双酚 S 的母离子、子离子、去簇电压和碰撞能量参数 249.0 子离子（m/z） DP（eV） CE（eV） 108.0 a 80 -25 156.0 80 -20 为定量离子。 定性测定 按照8.1条件测定标准品和样品，如果样品中化合物质量色谱峰的保留时间与标准溶液的保留时间 相比在允许偏差±2.5%之内；待测化合物定性离子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或等于3，定量离 子对的重构离子色谱峰的信噪比大于或等于10；定性离子对的相对丰度与浓度相当的标准溶液相比，相 对丰度偏差不超过表2的规定，则可判断样品中存在相应的目标化合物。双酚S标准物质的液相色谱-质 谱/质谱总离子流色谱图参见附录A中的图A.1。 表2 定性时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度/% ＞50 ＞20～50 ＞10～20 ≤10 允许的相对偏差/% ±20 ±25 ±30 ±50 8.3 标准工作曲线绘制 按照8.1色谱/质谱条件，对BPS标准工作溶液（5.4.3）进行检测。得到标准溶液中BPS的峰面积， 以BPS的质量浓度为横坐标，定量离子对峰面积为纵坐标，绘制标准工作溶液回归曲线，得到线性方程。 食品模拟物试液中双酚S浓度按式（1）计算： c = Ask + b ........................................ (1) 式中： c ——食品模拟物试液中双酚S的浓度，单位为微克每升（µg/L）或微克每千克（µg/kg）； As——食品模拟物试液中双酚S的峰面积； k ——回归曲线的斜率； b ——回归曲线的截距。 4 DB35/T 1851—2019 8.4 双酚 S 特定迁移量的转化计算 由8.1得到的食品模拟物试液中双酚S浓度，根据迁移实验中所使用的食品模拟物的体积和测试试样 2 与食品模拟物检出面积，通过数学换算计算出双酚S的特定迁移量，单位以µg/kg或µg/dm 表示。具体操 作参考GB 5009.156的规定。 计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 9 重现性 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对值偏差不得超过算术平均值的10%。 10 检出限 本标准水溶性食品模拟物中双酚S的检出限为1.00 µg/L、定量限为3.00 µg/L，油性食品模拟物中 双酚S的检出限为1.00 µg/kg、定量限为3.00 µg/kg。 5 DB35/T 1851—2019 AA 附 录 A （资料性附录） 双酚 S 标准物质的液相色谱-质谱/质谱总离子流色谱图 双酚S标准物质的总离子流色谱图如图A.1所示。 图A.1 双酚 S 标准物质的总离子流色谱图 _________________________________ 6