羊福利养殖场胃肠道线虫病控制与效果评价

ICS 65.020.30 CCS B41 15 内 蒙 古 自 治 区 地 方 标 准 DB15/T 2505—2022 羊福利养殖场胃肠道线虫病控制与 效果评价 Guidance of control and effect for gastrointestinal nematodiasis of sheep in welfare farm 2022-01-25 发布 2022-02-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 2505—2022 前 言 本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定 起草。 本文件由内蒙古畜牧业标准化技术委员会（SAM/TC 19）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、内蒙古大学。 本文件主要起草人：罗晓平、李军燕、翟琇、郭天龙、李健、杨燕燕、张英、高娃、王德宝、达来 宝力格、刘威、张月梅、张帆、赛音、王莉梅。 I DB15/T 2505—2022 羊福利养殖场胃肠道线虫病控制与效果评价 1 范围 本文件规定了福利养殖场绵羊胃肠道线虫病控制、检测及效果评价的技术要求，其他种类的羊可参 照执行。 本文件适用于福利养殖场绵羊胃肠道线虫病控制，其他养羊场户可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB 18596 畜禽养殖业污染物排放标准 GB/T 19526 羊寄生虫病防治技术规范 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 动物福利 animal welfare 为动物提供适当的营养、环境条件，使其免受饥渴、不适、疼痛、疾病、恐惧和悲痛，并能自由表 达正常行为。 福利养殖场 welfare farm 按照动物福利要求进行羊只饲养的养殖场。 羊胃肠道线虫 gastrointestinal nematode of sheep 寄生于羊胃肠道内的线虫，包括食道口属、 毛圆属、细颈属、马歇尔属、血矛属、仰口属、古柏 属、类圆属、毛尾属、夏伯特属线虫等。 克粪便虫卵数 eggs per gram of feces（EPG） 1g粪便中某种寄生虫虫卵的数目，是用来表示感染强度的指标。 1 DB15/T 2505—2022 4 胃肠道线虫病控制 药物控制技术 4.1.1 药物选择 根据羊群感染的主要寄生虫种类选择驱虫药物按照附录A中的表A.1。选择的驱虫药物应符合《中华 人民共和国兽药典》、《中华人民共和国兽药规范》和《兽药质量标准》的相关规定，且来自正规的生 产企业，具有《兽药生产许可证》和产品批文，标签应符合《兽药管理条例》的规定。 4.1.2 药物投放 根据胃肠道线虫病监测数据，当羊群胃肠道线虫虫卵阳性率达到30 %或EPG大于500的羊只占比达 到15 %以上，选择在清晨空腹条件下，严格按照药品说明书的剂量和途径进行给药。具体操作按照GB/T 19526 相应部分的规定执行。肉用及乳用羊只，严格执行休药期制度。 4.1.3 排泄物处理 药物驱虫后48 h内的粪便，应按照GB 18596相应部分的规定处理，达到NY/T 1168相应部分的规定 方可排放，严禁直接用作肥料。 放牧管理 避免清晨、傍晚、阴雨天放牧，尤其避免羊只在带露水的草场放牧。对羊群进行划区轮牧，减少羊 群感染胃肠道线虫的风险。 药物驱虫后48 h内羊只集中管理，避免污染草场。 5 胃肠道线虫检测 基础母羊、后备母羊和种公羊胃肠道线虫检测 在3月及11月，以羊群为单位，通过虫卵漂浮法按照附录B的规定和稀释虫卵计数法按照附录C的规 定或改良麦克马斯特虫卵计数法按照附录D的规定对羊只感染胃肠道线虫情况进行检测。 育肥羊胃肠道线虫检测 在育肥前，以羊群为单位，通过虫卵漂浮法和稀释虫卵计数法或改良麦克马斯特虫卵计数法对羊只 感染胃肠道线虫情况进行检测。 6 样本抽样采集 抽样比例 对于羊群，采用抽样检测的方法。抽样标准为（X表示同一羊群中羊只的数目）： X小于30，100 %采样；X不小于30且小于100，30 %采样；X不小于100且小于300，15 %采样；X不小 于300且小于1000，10 %采样；X不小于1000，5 %采样。但不论羊群大小，抽样总数不应小于15只且不 大于50只（除羊只数小于15只外）。 2 DB15/T 2505—2022 对于圈舍，同样采用抽样检测的方法。抽样标准为（X表示同一养殖场中圈舍的数目）：X小于10， 50 %采样；X不小于10且小于50，20 %采样；X不小于50且小于100，10 %采样；X不小于100，5 %采样。 但不论养殖场规模大小，抽样总数不应小于3个（除圈舍数小于3个外）。 对于不同年龄段分圈饲养的羊群，抽样应包含基础母羊圈，后备母羊圈、育肥羊圈、种公羊圈、羔 羊圈。对于不同年龄段混养的羊群，抽样应包含基础母羊30 %，后备母羊30 %、育肥羊20 %、种公羊 5 %、羔羊15 %。 样本采集与保存 采用一次性PE手套，对待检羊只进行直肠采粪，每一样本取样量为5 g左右（直径0.5 cm羊粪约10 粒），编号后置于4 ℃保存。同时，应对待检羊只的编号、性别、年龄、用药情况等做详细记录按照附 录E的规定。 7 检测结果判定 根据寄生虫虫卵特征见附录F，对养殖场羊只感染胃肠道线虫种类进行鉴定，同时计算粪便虫卵阳 性率和EPG大于500的羊只占比。 采用下式计算粪便虫卵阳性率 FECPR = 100(n/N)% …………（1） 式中： FECPR —— 粪便虫卵阳性率； n —— 阳性样本数； N —— 样本总数。 采用下式计算EPG大于500的羊只占比 R = 100(m/N)%…………（2） 式中： R —— EPG大于500的羊只占比； m —— EPG大于500的羊只数； N —— 样本总数。 8 数据记录 以养殖场为单位，建立并保存能够反映本场羊群胃肠道线虫病变化及达到各个防治阶段标准的数 据资料，所有数据应记录在案按照附录E的规定。 9 效果评价 严重感染（Ⅴ级） 羊胃肠道线虫虫卵EPG大于500的羊只占比大于70 %。 3 DB15/T 2505—2022 重度感染（Ⅳ级） 羊胃肠道线虫虫卵EPG大于500的羊只占比大于50 %且不大于70 %。 中度感染（Ⅲ级） 羊胃肠道线虫虫卵EPG大于500的羊只占比大于30 %且不大于50 %。 轻度感染（Ⅱ级） 羊胃肠道线虫虫卵EPG大于500的羊只占比大于5 %且不大于30 %。 轻微感染（Ⅰ级） 羊胃肠道线虫虫卵EPG大于500的羊只占比不大于5 %，且羊群虫卵阳性率不大于30 %。 感染控制 羊群胃肠道线虫虫卵阳性率不大于5 %。 感染阻断 连续三年粪便虫卵检测未发现羊群感染胃肠道线虫。 消除 达到感染阻断要求后，连续三年粪便虫卵检测未发现羊群感染胃肠道线虫，且剖解羊只后未检出胃 肠道线虫。 4 DB15/T 2505—2022 A A 附 录 A （规范性） 用于胃肠道线虫控制的药物 驱胃肠道线虫药物及其用法见表A.1。 表A.1 驱胃肠道线虫药物及其用法 休药期 泌乳期 肉用 活性成分 制剂 剂量 伊维菌素 伊维菌素片 0.2 mg/kg 内服 禁用 伊维菌素 伊维菌素注射 液 0.2 mg/kg 皮下注射 伊维菌素 伊维菌素溶液 芬苯达唑 芬苯达唑片 芬苯达唑 芬苯达唑粉 阿苯达唑 阿苯达唑片 枸橼酸哌 嗪 枸橼酸哌嗪片 盐酸左旋 咪唑 盐酸左旋咪唑 片 7.5 mg/kg 内服 盐酸左旋 咪唑 盐酸左旋咪唑 注射液 7.5 mg/kg 皮下注射 氧阿苯达 唑 氧阿苯达唑片 氯氰碘柳 胺钠 氯氰碘柳胺钠 注射液 奥芬达唑 奥芬达唑片 碘硝芬 碘硝芬注射液 0.2 mg/kg 内服 5 mg/kg～7.5 mg/kg 内服 5 mg/kg～7.5 mg/kg 内服 10 mg/kg～15 mg/kg 内服 0.25 g/kg ～ 0.3 g/kg 内服 5 mg/kg ～10 mg/kg 内服 5 mg/kg～10 mg/kg 皮下或肌肉 5 mg/kg～7.5 mg/kg 内服 10 mg/kg～20 mg/kg 皮下注射 作用 用途 35 d 大环内酯类 抗寄生虫药 防治羊线 虫病 禁用 35 d 大环内酯类 抗寄生虫药 防治家畜 线虫病 禁用 35 d 大环内酯类 抗寄生虫药 防治羊线 虫病 禁用 21 d 抗蠕虫药 用于畜禽 线虫病 妊娠前期忌用； 弃奶期 7 d 禁用 14 d 抗蠕虫药 用于畜禽 线虫病 妊娠前期忌用； 弃奶期 5 d 4 d 抗蠕虫药 用于畜禽 线虫病 妊娠期前 45 d 忌用； 弃奶期 60 h 28 d 抗蠕虫药 治蛔虫、 食道口线 虫 禁用 3 d 抗蠕虫药 用于羊胃 肠道线虫 禁用 28 d 抗蠕虫药 用于羊胃 肠道线虫 4 d 抗蠕虫药 用于畜禽 线虫病 妊娠前期慎用 28 d 抗蠕虫药 防治羊胃 肠道线虫 对局部组织有一定的 刺激性；弃奶期 28 d 7 d 抗蠕虫药 用于羊线 虫病 禁用 90 d 抗寄生虫药 用于羊线 虫病 注意事项 仅限皮下注射，且每 个注射点不宜超过 10 mL 绵羊给药后可引起暂 时性兴奋，可用阿托 品解毒 绵羊给药后可引起暂 时性兴奋，可用阿托 品解毒 安全范围窄，剂量过 大见失明、呼吸困 难、抽搐甚至死亡。 组织中幼虫效果差，3 周后应重复用药。弃 奶期 90 d 5 DB15/T 2505—2022 B B 附 录 B （规范性） 饱和盐水漂浮法 B.1 实验设备、耗材及试剂 普通光学显微镜、天平、烧杯、镊子、量筒、40目筛网、安剖瓶、载玻片、盖玻片、热水壶、食用 盐、纯净水。 B.2 饱和盐水配置 取400 g食用盐溶于1000 mL煮沸的纯净水中，充分搅拌，冷却后使用。 B.3 实验方法 B.3.1 样本处理 取新鲜粪便样品2 g于50 mL烧杯中，加少许饱和食盐水用镊子压碎，加饱和食盐水至20 mL，搅拌 均匀，40目筛网过滤，将滤液置于安剖瓶中，使液面略高于瓶口，静置30 min。 B.3.2 观察 用盖玻片轻轻蘸取漂浮液液面后，置于载玻片上，通过显微镜观察、鉴定，并记录。 6 DB15/T 2505—2022 C C 附 录 C （规范性） 稀释虫卵计数法 C.1 实验设备、耗材及试剂 普通光学显微镜、移液器、天平、烧杯、镊子、量筒、凹玻片、盖玻片、40目筛网、吸管、电磁炉、 蔗糖、甲醛、纯净水。 C.2 饱和蔗糖水配置 向沸水中加入蔗糖颗粒并不断搅拌，直至不再溶解。冷却后，加入适量石炭酸以阻止霉菌生长。 C.3 粪便稀释液配置 取2 mL甲醛溶于98 mL纯净水中，即得。 C.4 实验方法 C.4.1 样本处理 取新鲜粪便样品2 g于100 mL烧杯中，加入30 mL纯净水（按1 g粪便加入15 mL纯净水计），用镊子 将粪便压碎、充分搅拌均匀，40目筛网过滤，将滤液搅拌混匀后，用移液器立即吸取中心处的液体0.3 mL与等体积饱和蔗糖水混匀于凹玻片中，同时加盖盖玻片，做两个重复。 C.4.2 观察 静置15 min后，通过显微镜计数两个室内的虫卵（注意计数位于暗区边缘的虫卵），并记录。 C.4.3 统计 将两个计数室的虫卵数取平均值，再乘以100，即可得到每克粪便虫卵数（EPG）。 7 DB15/T 2505—2022 D D 附 录 D （规范性） 改良麦克马斯特虫卵计数法 D.1 实验设备、耗材及试剂： 普通光学显微镜、麦克马斯特虫卵计数板、天平、烧杯、镊子、量筒、40目筛网、吸管、热水壶、 食用盐、纯净水。 D.2 饱和盐水配置 取400 g食用盐溶于1000 mL煮沸的纯净水中，充分搅拌，冷却后使用。 D.3 实验方法： D.3.1 样本处理 取新鲜粪便样品2 g于100 mL烧杯中，加入58 mL饱和食盐水并用镊子将粪便压碎、搅拌均匀，40目 筛网过滤，将滤液搅拌混匀后，用吸管立即吸取中心处的液体于麦克马斯特虫卵计数板的计数室内。 D.3.2 观察 静置2 min后，通过显微镜计数两个计数室内的虫卵，并记录。 D.3.3 统计 将两个计数室的虫卵数取平均值，乘以200，可得到EPG。 8 DB15/T 2505—2022 E E 附 录 E （规范性） 样本采集及检测记录表 样本采集及检测记录表见表E.1。 表E.1 样本采集及检测记录表 场/户名： 采样时间： 地址： 畜种： 养殖场规模：共 【基础母羊 共 【基础母羊 圈；后备母羊 日 圈；育肥羊 圈；种公羊 圈；羔羊 圈】 只；育肥羊 只；种公羊 只；羔羊 只】 只羊。 只；后备母羊 药物种类（名称）： 圈号： 检测时间： 耳标号 月 个圈（群）。 上次驱虫时间： 编号 年 畜龄 性别 记录人： 虫卵漂浮 虫卵计数（EPG） 备注 9 DB15/T 2505—2022 F F 附 录 F （资料性） 羊常见胃肠道线虫虫卵的特征 羊常见胃肠道线虫寄生部位及虫卵特征见表F.1。 表F.1 羊常见胃肠道线虫寄生部位及虫卵的特征描述 虫种名称 绵羊毛首线虫 寄生 虫体大小 部位 (mm) 盲肠 Trichuris ovis 奥利春细颈线虫 Nematodirus 小肠 oiratianus 蒙古马歇尔线虫 Marshallagia 皱胃 mongolica 捻转血矛线虫 Hcemonchus 皱胃 contortus 虫卵图谱 形态描述 ♂50.0～80.0 虫卵腰鼓形，黄褐 ♀35.0～70.0 色，两端具塞。 ♂9.0～12.0 虫卵很大，卵内细胞 ♀12.0～16.0 色黑较大。 ♂10.7～14.0 虫卵很大，卵细胞色 ♀12.3～16.8 较淡、较小且密集。 ♂18.0～22.0 虫卵椭圆形，卵壳略 ♀18.0～30.0 带黄色。 ♂7.5～12.0 虫卵椭圆形，系典型 ♀10.3～12.8 的圆线虫类虫卵。 长径 辐径 (μm) (μm) 70～80 30～40 255～272 119～153 182～217 83～115 75～95 40～50 89～95 46～59 环纹奥斯特线虫 Ostertagia circumcincta 10 皱胃 DB15/T 2505—2022 表F.1 羊常见胃肠道线虫寄生部位及虫卵的特征描述（续） 虫种名称 叶氏古柏线虫 Cooperia erschovi 寄生 虫体大小 部位 (mm) 皱胃 小肠 胰脏 蛇形毛圆线虫 Trichostrongylus 小肠 colubriformis 羊仰口线虫 Bunostomum 小肠 trigonocephalum 哥伦比亚食道口线虫 Oesophagostomum 结肠 columbianum 绵羊夏伯特线虫 Chabertia ovina 大肠 ♂4.7～11.1 ♀8.8～11.4 ♂4.5～5.0 ♀5.0～6.0 ♂12.0～17.0 ♀19.0～26.0 ♂12.0～13.5 ♀16.7～18.6 ♂17.0～20.0 ♀24.0～27.0 虫卵图谱 长径 辐径 (μm) (μm) 虫卵椭圆形。 67～73 22～41 虫卵椭圆形。 73～76 40～43 82～97 47～57 65～75 40～45 虫卵椭圆形。 85～130 42～56 虫卵椭圆形，较小。 42～60 25～36 形态描述 虫卵两端钝圆，两侧 平直，胚细胞大而数 少，内含暗色颗粒。 虫卵椭圆形，刚排出 时内含卵裂细胞 816 个。 乳突类圆线虫 Strongyloides papillosus 小肠 4.38～5.92 11